1、消毒剂的性质 各种消毒剂，由于其本身的化学特性和化学结构不同，因而其对微生物的作用方式也不相同，所以各类消毒剂的消毒效果也不一致。

2、消毒剂的浓度 在一定的范围内，消毒剂的浓度越大，其对微生物的毒性作用也越强。但是消毒剂浓度的增加是有限度的，超越此限度时，并不一定能提高消毒效力，有时一些消毒剂的杀菌效力反而随浓度的增高而下降，如70%~75%酒精的杀菌作用比95%的酒精强。

3、微生物的种类 由于微生物本身的形态结构及代谢方式等生物学特性的不同，其对消毒剂所表现的反应也不同。

4、温度及时间 一般消毒剂在较高温度下消毒效果较低温度下好。温度升高可以增强消毒剂的杀菌能力，并能缩短消毒时间。当温度增加10℃，酚类的消毒速度增加8倍以上。在其他条件都一定的情况下，作用时间越长，消毒效果越好。消毒剂杀灭细菌所需时间的长短取决于消毒剂的种类、浓度及其杀菌速度，同时也与细菌的种类、数量和所处的环境有关。

5、湿度 在熏蒸消毒时，湿度可作为一个环境因素影响消毒效果。用过氧乙酸及早醛薰蒸消毒时，相对湿度以60%~80%为最好。湿度太低，则消毒效果不良。

6、酸碱度（PH）许多消毒剂的消毒效果均受消毒环境PH的影响。一般来说，未电离的分子较易通过细菌的细胞膜，杀菌效果较好。

7、有机物的存在 当微生物所处的环境中有有机物如粪便、痰液、脓汁、血液及其他排泄物存在时，由于消毒剂首先与这些有机物结合，而大大减少与微生物作用的机会，同时，这些有机物的存在，对微生物也具有机械的保护作用，结果使消毒剂的杀毒作用大为降低。所以，在消毒皮肤及创口时，要先洗净，再行消毒。对于痰液、粪便、动物圈舍的消毒应选用受有机物影响较小的消毒药物，同时应适当提高消毒剂的浓度，延长消毒时间，方可达到良好的消毒效果。